Comenzando a trabajar en la imagen, y no terminándola, Leonardo regresó a ella hacia el final de su vida. Según Giorgio Vasari, después de regresar a su ciudad natal, recibió una orden para pintar el altar de la iglesia de Santissima Annunziata en Florencia.
Mientras trabajaba en el monasterio, en la iglesia, primero realizó un dibujo depredador. Hay documentos que el dibujo se mostró durante dos días y causó admiración. Ante nosotros hay una escena llena de movimiento: Mary está en el regazo de su madre, St. Anne.
El niño de un año de edad se le escapa de las manos a la madre. Se apartó de ella, jugando con el cordero.
Casi levantándose de las rodillas de Santa Ana, Mary está tratando de jalar al niño. Quizás Anna representa a la Iglesia, que no quiere que nada se interponga en el camino de la Pasión de Cristo. Hay algunos elementos similares a la Casa de Cartón de Burlington.
Es especialmente sorprendente que en los rostros de María y su madre no haya una gran diferencia de edad, como en las pinturas de otros artistas.
Además, parece que las figuras de las mujeres se funden en una sola, incluso el bebé es parte de ella. Todo esto subraya la estrecha relación entre Ana, María y Cristo, pero la disposición de cada uno indica su papel en esta familia. Además de la riqueza de movimientos, la pintura está golpeando un paisaje enorme, que ocupa un tercio de la imagen, esto se caracteriza por la obra de Leonardo da Vinci. Las altas montañas y los valles, incluso las tierras bajas, se elevan por encima del grupo. La naturaleza es el hogar!
El paisaje también puede interpretarse como un simbolismo: tierra estéril, quemada por el sol, luz brillante, puede leerse como un símbolo de María que pide un niño.