La pintura, encargada por el emperador Carlos V, se realizó en Augsburgo en 1548.Isabel de Portugal se casó con el emperador Carlos V en 1526. Murió muy joven cuando solo tenía 36 años, y mucho antes de que Carlos V autorizara a Tiziano a pintar su retrato. Su rostro pálido enfatiza su suavidad, que también es visible en los dedos delgados de sus manos.
Todo el retrato se centra en la magnífica armonía de colores rojo, blanco y dorado. El contraste de colores encantador es proporcionado por los tonos azules y verdes del paisaje.
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